产品货号：
M20258
中文名称：
RNase H
英文名称：
Ribonuclease H
产品规格：
100U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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RNase H是从大肠杆菌表达纯化获得的一种核糖核酸内切酶，可以特异性水解DNA-RNA杂合链中的RNA。
| 来源 | E.coli MRE-600 cells |
| 分子量 | 18.4kDa单体 |
| 酶活 | 5U/μL |
一个单位定义为在总反应体积50μL，37℃，20min条件下，从20 picomoles荧光标记的50碱基对RNA-DNA杂交体产生1 nmo L核糖核苷酸所需的酶量。
| 组分 | 规格 |
| RNase H(5U/μL) | 20μL |
| 说明书 | 1份 |
保存：-20℃，有效期1年。
10mM Tris-HCl，50mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，200μg/mL BSA，50% (v/v) glycerol，pH7.4@25℃。
10×Reaction Buffer：
500mM Tris-HCl，750mM KCl，30mM MgCl2，100mM DTT，pH8.3@25℃。
- 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
- 解冻10×Reaction Buffer时出现白色沉淀是正常现象，白色沉淀物是Buffer中的DTT，可混匀后使用。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- DNA-RNA杂合链中去除RNA：
- 在冰浴中向已经合成第一条链的20μL反应体系中依次加入如下试剂：
成分 用量 Deionized water (Nuclease-free) 17.8μL 10×Reaction Buffer 2μL RNase H 0.2μL - 轻轻混匀，随后离心沉淀液体。
- 37℃孵育1h。
- 加入2.5μL 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
- DNA-RNA杂合链中去除RNA的条件可以参考上述条件进行，RNase H反应的pH范围为7.5-8.3。
- 在冰浴中向已经合成第一条链的20μL反应体系中依次加入如下试剂：
- 杂合链中RNA的去除和cDNA第二链的合成：
需自备试剂DNA Polymerase I。- 在冰浴中向已经合成第一条链的20μL反应体系中依次加入如下试剂：
成分 用量 Deionized water (Nuclease-free) 17.8μL 10×Reaction Buffer 2μL RNase H 0.2μL DNA Polymerase I 30U - 按上述体系配好之后，轻轻混匀，随后离心沉淀液体。
- 15℃孵育2h。
- 温度不要超过15℃。
- 加入5μL 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
- 在冰浴中向已经合成第一条链的20μL反应体系中依次加入如下试剂：
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